服务介绍
什么是化妆品防腐挑战测试 防腐挑战测试，是化妆品测试的重要项目。该方法是将一定量的具有代表性的微生物加入到化妆品中，模拟化妆品生产和使用过程中受到高强度微生物污染的潜在可能性和自然界中微生物生长的最适宜条件，将样品经培养一定时间后，分别测试样品中微生物数量，根据样品中微生物的数量变化情况来评价化妆品的防腐效能。
服务范围全国
检测周期5-7个工作日，可加急
相关资质可提供CMA、CNAS检测报告
服务模式快递寄样、现场取样、人工送样
服务对象企事业单位、高等院校、科研院所
服务方向采购销售、竞标投标、生产研发、科研数据、诊断优化、司法服务
检测标准国家标准、行业标准、企业标准、地方标准、国外标准、非标定制
服务内容
化妆品防腐挑战测试
防腐挑战测试，是化妆品测试的重要项目。该方法是将一定量的具有代表性的微生物加入到化妆品中，模拟化妆品生产和使用过程中受到高强度微生物污染的潜在可能性和自然界中微生物生长的最适宜条件，将样品经培养一定时间后，分别测试样品中微生物数量，根据样品中微生物的数量变化情况来评价化妆品的防腐效能。
化妆品防腐挑战测试常见的官方测试标准
常见的官方机构或组织制定的测试标准有：
1、美国药典USP 40. <51> Antimicrobial Effectiveness Testing；
2、欧洲药典EP <9.0> 5.1.3 Efficacy of Antimicrobial Preservation；
3、美国个人护理产品协会PCPC 2016. Microbiology Guidelines；
4、国际标准化组织ISO 11930-2019 Cosmetics-Microbiology-Evaluation of the antimicrobial protection of a cosmetic production。
这些测试标准在操作流程、接种方式、接种量、评价时间方面有很大程度的相似性和一致性，主要在评判标准方面有不同，本文接下来将对这些标准的主要异同点进行详细的分析说明。
值得一提的是，除了上述这些官方标准外，有些原料商和成品生产商会制定自己内部的测试方法和评判标准。如果您对选择何种测试方法有所犹豫，我们推荐选择官方标准，这些标准更具权威性，被国内外市场广泛认可。
化妆品防腐挑战测试-操作流程
各防腐挑战测试标准的常规流程都为：
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取样：称取一定量的测试样品；
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接种：在测试样品中加入测试微生物，微生物的量不超过样品量的1%，样品中最终的微生物含量为105~106cfu/g；
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测定微生物含量：将样品培养2、7、14、21、28d后，分别取出一定量的样品测定微生物含量；
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计数：计算各时间点的样品中的微生物含量，根据微生物含量的对数减少值来判定是否通过标准。
化妆品防腐挑战测试-测试微生物的选择
测试微生物包括细菌和真菌这两大类，细菌包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，真菌包括酵母菌和霉菌，各防腐挑战测试标准推荐的微生物见表1。其中，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母、黑曲霉这五种菌是最常用的测试微生物。如果样品经常被环境中某一种菌污染，也可加入这种污染菌进行防腐挑战测试。
化妆品防腐挑战测试-接种方式
接种方式分为单菌接种或者混菌接种，一次接种或者多次接种。各测试标准的接种方式见表2。
- 单菌接种：是每份样品加入单一的测试菌，这种方式可以反映样品对某一种菌的防腐作用，更适合实验室研究或者对某种经常出现的污染菌进行单独测试。
- 混菌接种：是样品中加入混合的微生物，测试时通常是细菌混合在一起，真菌混合在一起，这种方式模拟自然界中微生物混生杂居的特点，更符合污染时的实际情况。
- 一次接种：是在整个测试周期中接种一次微生物。
- 多次接种：是在整个测试周期中进行多次接种。
各官方测试标准都推荐使用一次接种，只有PCPC提及“对高风险样品可进行再次挑战实验”，但也并未对多次挑战的实验方法及评判标准进行明确的规定。一般接触到的多次接种是企业自己制定的企标，包括加几次菌，在哪些时间点加菌，以及相应的评判标准都由企业自己制定。不同企业制定的标准差异较大，按照各自企标测试出的结果不具有比较性。如果送检方不做特殊要求的话，一般第三方检测机构均按照官方标准进行一次接种，出具检测报告。康派斯测试中心曾就防腐挑战测试结果和产品存放的实际情况做过为期2年的跟踪调查，结果表明，按照CTFA（现更名为PCPC）防腐挑战标准进行为期28天的一次接种测试，能通过测试标准的产品，在实际存放2年后也同样有优良的防腐效果（参考文献：陈仪本, 欧阳友生, 陈娇娣等. 化妆品防腐体系的效能评价与实际效果的相关性[J]. 日用化学工业, 2001, 31(2):3.）。一次接种已足够反映样品的防腐效能，也更被国内外市场接受认可。
04 评价标准
测试结论是通过第2/7/14/21/28d的微生物含量的对数减少值来判定，各测试标准的评价标准见表3。这些评价标准都适用于一次接种的测试方法，不适用于多次接种。EP和ISO 11930的同一标准下分为A和B两个标准，A比B的要求高，B是需要满足的最低标准。在这些评价标准中，EP-A是要求最高的，USP是要求最低的。在有其它减少微生物污染风险的因素存在的条件下，通过低要求的标准即可，比如，化妆品的生产严格遵循良好生产质量管理规范(GMP)的原则，包装物不易发生二次污染等。
化妆品的防腐涉及配方、生产、包装、储存、消费者使用等多个方面，多从生产包装等方面控制微生物污染源，减少配方中防腐体系的添加量，在满足化妆品防腐功效的前提下降低配方的刺激性，是必然趋势，并不一定要追求配方的防腐体系必须通过最严格的标准。
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化妆品皮肤不良反应是指使用化妆品引起的皮肤、黏膜、附属器病变。以下是关于化妆品皮肤不良反应的诊疗指南的主要内容：
化妆品不良反应-病因
1. 化妆品成分中的刺激和致敏物质：化妆品皮肤不良反应最常见的是接触性皮炎，常由香料、防腐剂、乳化剂、抗氧化剂、防晒剂、植物添加剂等成分引起，最常见的是香料和防腐剂。此外，表面活性剂、颜料或染料（染发剂、指甲油等）、人造指甲材料及黏合剂等也是常见的刺激物。化妆品中的光敏性成分常引发光感性皮炎。
2. 局部皮肤屏障功能破坏：皮肤角质层细胞的致密结构与角蛋白、脂质紧密有序地排列，构成物理性屏障，以抵御外界各种物理、化学和生物性有害因素对皮肤的侵袭。皮肤屏障功能不完整或被破坏时，其对外用化学物质吸收增加，神经末梢受到的保护减少，经皮失水增加，是导致皮肤敏感的原因之一。
3. 非法添加违禁成分或限用成分浓度超标：少数不合格化妆品中非法添加违禁成分如糖皮质激素、抗生素和重金属，或限用成分如果酸浓度超标等。可引起糖皮质激素依赖性皮炎、重金属中毒，严重者出现系统损害等。
4. 其他：患者为自身敏感体质或患其他导致皮肤敏感的皮肤病，如玫瑰痤疮、特应性皮炎等；产品说明书不准确导致使用方法不当或未按说明书正确使用。
化妆品不良反应-发病机制
1. 刺激反应：由化妆品直接接触皮肤黏膜引起的损伤，是一种细胞毒反应。皮肤暴露于强刺激性化妆品后，受损皮肤失去完整性，表皮"砖墙结构"中双层脂质分子结构被破坏，经表皮失水增加，角质层水合程度下降，同时表皮中产生大量促炎因子。刺激性接触性皮炎无免疫记忆，参与反应的细胞包括CD4+ T细胞与Th1细胞。
2. 变态反应：化妆品皮肤不良反应多属于此类。系化妆品成分在接触部位启动的由细胞介导的超敏反应。化妆品成分多属半抗原，进入表皮后结合载体蛋白形成完全抗原，刺激角质形成细胞释放炎症细胞因子和趋化因子，激活朗格汉斯细胞、树突细胞以及内皮细胞。当皮肤再次接触此类化妆品成分时，抗原提呈细胞激活记忆T细胞，启动炎症反应。
3. 光敏反应：可分为光变态反应和光毒反应，以光变态反应为主，一般属于迟发型超敏反应，也有IgE介导的Ⅰ型速发型超敏反应。光能对完全抗原的形成起一定作用，可通过光化学途径改变化妆品半抗原结构，新生半抗原与蛋白结合形成新的完全抗原，诱导免疫反应发生。
4. 致痤疮样效应：矿物油刺激毛囊皮脂腺结构，引起毛囊口上皮细胞增殖与角化过度，使皮脂排出障碍；毛囊皮脂腺导管发生机械性阻塞，致毛囊阻塞、皮脂积聚而形成痤疮。
5. 致色素异常机制：化妆品成分可通过直接刺激、光敏反应等炎症反应刺激黑素细胞增殖和酪氨酸酶活性增高，引起皮肤色素沉着，或长期经皮吸收作用（某些染料、重金属等）导致局部皮肤色素增加。
化妆品不良反应-临床表现及分类
1. 接触性皮炎：包括非免疫性机制引起的刺激性接触性皮炎和免疫机制引起的变应性接触性皮炎。刺激性接触性皮炎为化妆品直接刺激造成的可见皮肤损害，初次使用化妆品后即可发生。变应性接触性皮炎是由于接触致敏物质引起的接触性皮炎，需一定致敏期才发生反应。
2. 光感性皮炎：由化妆品中某些成分与光线共同作用引起的光毒性或光变应性皮炎。有明确的化妆品接触史和光照史，皮损主要发生于使用化妆品后的光照部位。
3. 皮肤色素异常：接触化妆品的局部及邻近部位发生的慢性色素异常改变，或在化妆品接触性皮炎、光感性皮炎消退后局部遗留皮肤色素沉着、色素减退或色素脱失。
4. 唇炎：唇部使用化妆品后发生在唇红部位的接触性皮炎，表现为干燥、裂隙、鳞屑、肿胀，可有瘙痒感。
5. 痤疮：连续接触化妆品后，在接触部位发生的痤疮样毛囊皮脂腺炎症。发病前有明确的化妆品使用史。
6. 接触性荨麻疹：皮损主要发生在化妆品使用部位，表现为接触化妆品后数分钟至数小时内发生水肿性红斑和风团。
7. 毛发损害：有明确的发用化妆品使用史，如洗发护发剂、发乳、发胶、染发剂、烫发剂、生发水、纹饰材料等。使用后出现毛发变脆、分叉、断裂、脱落、失去光泽、变形等病变。
8. 甲损害：有明确的甲用化妆品使用史，在甲及甲周发生病变。表现为甲板变形，软化剥离，脆裂，失去光泽。
9. 其他皮肤不良反应：化妆品糖皮质激素依赖性皮炎是由于长期使用添加糖皮质激素的不合格产品，停用后出现皮肤刺痒、灼热不适及肿胀、红斑、鳞屑、丘疹、毛细血管扩张、痤疮加重等戒断症状。
化妆品不良反应-诊断与鉴别诊断
1. 诊断：各种化妆品皮肤不良反应均有化妆品使用史，停止使用可疑化妆品后症状消失或缓解，再次使用同类化妆品后症状可复发或加重，结合典型临床表现，可明确诊断。
2. 鉴别诊断：化妆品皮肤不良反应的诊断需排除其他原因所致的皮肤病变。化妆品接触性皮炎应与湿疹、脂溢性皮炎、糖皮质激素依赖性皮炎、光线性皮炎、多形性日光疹等疾病相鉴别。
化妆品不良反应-处理原则
1. 停用引起病变或可疑引起病变的化妆品，根据不良反应的类型对症治疗。
2. 化妆品接触性皮炎：可按接触性皮炎的治疗原则进行。以对症治疗为主，局部治疗可根据外用药使用原则进行选择。
3. 化妆品光感性皮炎：应尽量避免阳光和紫外线暴露。按照光毒性皮炎或光变应性皮炎的治疗原则对症治疗。
4. 化妆品皮肤色素异常：注意避免阳光和紫外线照射。可以按照一般色素沉着性皮肤病或色素脱失性皮肤病治疗。
5. 其他：化妆品接触性荨麻疹按荨麻疹的治疗原则对症治疗；化妆品痤疮按痤疮的治疗原则，如抗炎、抗菌和角质溶解等方法对症处理。
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